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分享ELISA加血清樣及反應(yīng)試劑操作技術(shù)要點

2018-03-16 [1385]

ELISA實驗辦法操作規(guī)范,用于ELISA測定的標(biāo)本zui為常用的是血清(漿),有時由于特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。
在處理和保存ELISA試劑盒方面要考慮以下幾個方面:
1.要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。
2.樣本的采集及血清別離中要留意盡量防止細(xì)菌污染。
3.血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長期保存,應(yīng)在-70℃以下。
4.冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。
ELISA試劑盒實驗辦法操作規(guī)范,加血清樣本及反響試劑:
在現(xiàn)在的ELISA產(chǎn)品試劑盒中,血清樣本的參加幾乎是僅有的要運用微量加樣器參加樣本的步驟。運用微量加樣器加樣必須留意的要害點是:加樣不行太快,要防止加在孔壁上部,不行濺起和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法確保微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺起會對附近孔產(chǎn)生污染。呈現(xiàn)氣泡則反響液界面有差異。試劑的參加在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要留意滴加的角度外,滴加的速度也很重要,滴加太快,很簡單呈現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象,這樣就會在孔內(nèi)的非包被區(qū)呈現(xiàn)非特異吸附,然后引起非特異顯色。所以,有時候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性,下次測定為陰性,往往就是上述加樣及試劑的過錯所致。

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