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Flag抗體/Flag antibody|進(jìn)口原裝Flag抗體/Flag antibody在免疫沉淀IP&免疫熒光IF中的應(yīng)用

2011/4/28 [1835]

Flag抗體/Flag antibody|進(jìn)口原裝Flag抗體/Flag antibody在免疫沉淀IP&免疫熒光IF中的應(yīng)用


Flag標(biāo)簽系統(tǒng)是已被*的用于表達(dá)、純化以及檢測(cè)融合蛋白的表達(dá)系統(tǒng),廣泛應(yīng)用于Western blotting、免疫細(xì)胞組化、免疫共沉淀、流式細(xì)胞術(shù)、蛋白純化以及蛋白相互作用、蛋白分離等多個(gè)研究領(lǐng)域。Flag標(biāo)簽是一個(gè)與重組蛋白相融合的由8個(gè)親水氨基酸(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys)組成的多肽片斷。FLAG標(biāo)簽只有8個(gè)氨基酸組成,因此它不會(huì)占據(jù)其他表位與結(jié)合域,避免導(dǎo)致融合蛋白的功能、分泌性以及轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)生改變。由于它的親水性特點(diǎn),F(xiàn)LAG標(biāo)簽傾向于定位在融合蛋白表面,因此更易與抗體結(jié)合以及被腸激酶酶解。

由于Flag標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,這一系統(tǒng)已用于各種細(xì)胞類型,包括細(xì)菌、酵母和哺乳細(xì)胞。由于Flag標(biāo)簽系統(tǒng)的純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋白。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號(hào)#E022060)可以用于檢測(cè)和Flag標(biāo)簽融合表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)定位,以及純化、定性或定量檢測(cè)Flag融合表達(dá)蛋白等。比如在免疫熒光IF的實(shí)驗(yàn)里,同時(shí)配合EarthOx的Dylight 549熒光二抗,使用該抗體可以準(zhǔn)確的定位出Flag融合表達(dá)蛋白在細(xì)胞內(nèi)的位置(如圖紅色顯示部分)。另外,做融合表達(dá)分析前,通過(guò)免疫共沉淀技術(shù)獲得Flag融合表達(dá)蛋白也是非常重要的一步,因此選擇一個(gè)合適的、可用于免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)Flag標(biāo)簽抗體也是很必要的。EarthOx的Anti-Flag Tag Monoclonal Antibody(貨號(hào)#E022060)不僅能應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)定位的IF實(shí)驗(yàn),同樣還能應(yīng)用于IP實(shí)驗(yàn)。1:200甚至更高的IP實(shí)驗(yàn)稀釋比率,也說(shuō)明了該抗體本身的具有很高的效價(jià),同時(shí),因?yàn)槭菃慰寺】贵w,因此特異性也很高。價(jià)所對(duì)應(yīng)的高稀釋比率也意味著。



 

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